ขั้นตอนเฉพาะสำหรับการใช้เครื่องหมุนเหวี่ยงตู้เย็นในการแยกไวรัสคืออะไร?

การแยกไวรัสเป็นกระบวนการที่สำคัญในการวิจัยไวรัสวิทยาการวินิจฉัยทางคลินิกและการพัฒนาวัคซีน เครื่องหมุนเหวี่ยงตู้เย็นมีบทบาทสำคัญในกระบวนการนี้ทำให้สามารถแยกอนุภาคไวรัสออกจากส่วนประกอบอื่น ๆ ในตัวอย่าง ในฐานะซัพพลายเออร์ของเครื่องหมุนเหวี่ยงตู้เย็นที่มีคุณภาพสูงฉันมีความเชี่ยวชาญในขั้นตอนการใช้เครื่องมือเหล่านี้ในการแยกไวรัส ในบล็อกนี้ฉันจะพาคุณผ่านขั้นตอนเฉพาะที่เกี่ยวข้อง

1. การเตรียมตัวอย่าง

ก่อนที่จะใช้เครื่องหมุนเหวี่ยงตู้เย็นสำหรับการแยกไวรัสการเตรียมตัวอย่างที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น

คอลเลกชันตัวอย่าง

ขั้นตอนแรกคือการรวบรวมตัวอย่างที่เหมาะสม สิ่งเหล่านี้อาจรวมถึงของเหลวชีวภาพเช่นเลือดน้ำลายหรือเนื้อเยื่อ homogenates ตัวอย่างเช่นในกรณีของไวรัสทางเดินหายใจจะใช้ swabs โพรงหลังจมูก เมื่อรวบรวมตัวอย่างควรปฏิบัติตามเทคนิคปลอดเชื้อที่เข้มงวดเพื่อป้องกันการปนเปื้อน

การทำให้เป็นเนื้อเดียวกัน (ถ้าจำเป็น)

หากตัวอย่างเป็นเนื้อเยื่ออาจจำเป็นต้องมีการทำให้เป็นเนื้อเดียวกันเพื่อปล่อยอนุภาคไวรัส อันเครื่องผสม homogenizerสามารถใช้เพื่อจุดประสงค์นี้ การทำให้เป็นเนื้อเดียวกันทำให้โครงสร้างเนื้อเยื่อลดลงและทำให้มั่นใจได้ว่าไวรัสจะกระจายอย่างสม่ำเสมอในการระงับ หลังจากการทำให้เป็นเนื้อเดียวกันตัวอย่างมักจะถูกกรองผ่านตัวกรองตาข่ายปรับเพื่อกำจัดเศษซากขนาดใหญ่

การเพิ่มบัฟเฟอร์

บัฟเฟอร์ที่เหมาะสมจะถูกเพิ่มเข้าไปในตัวอย่างเพื่อรักษาค่า pH และออสโมติก บัฟเฟอร์เหล่านี้ยังสามารถมีสารยับยั้งโปรตีเอสเพื่อป้องกันการสลายตัวของโปรตีนไวรัส ทางเลือกของบัฟเฟอร์ขึ้นอยู่กับประเภทของไวรัสที่ถูกแยกและวิธีการวิเคราะห์ที่ตามมา

2. กำลังโหลดเครื่องหมุนเหวี่ยงตู้เย็น

เมื่อเตรียมตัวอย่างแล้วก็ถึงเวลาที่จะโหลดลงในเครื่องหมุนเหวี่ยงตู้เย็น

การเลือกใบพัดด้านขวา

ขั้นตอนแรกในการโหลดเครื่องหมุนเหวี่ยงคือการเลือกโรเตอร์ที่เหมาะสม ใบพัดที่แตกต่างกันมีความสามารถที่แตกต่างกันและได้รับการออกแบบสำหรับตัวอย่างเฉพาะและข้อกำหนดการแยก สำหรับการแยกไวรัสอาจมีการใช้โรเตอร์มุมคงที่หรือการแกว่ง - ใบพัดถัง ใบพัดแบบคงที่ - เหมาะสำหรับอนุภาคไวรัสอัดเม็ดในขณะที่การแกว่ง - ใบพัดถังจะดีกว่าสำหรับการหมุนเหวี่ยงไล่ระดับความหนาแน่น

ปรับสมดุลตัวอย่าง

การปรับสมดุลเป็นขั้นตอนสำคัญในการใช้เครื่องหมุนเหวี่ยง โหลดที่ไม่สมดุลอาจทำให้เกิดการสั่นสะเทือนมากเกินไปสร้างความเสียหายให้กับการหมุนเหวี่ยงและนำไปสู่ผลลัพธ์ที่ไม่ถูกต้อง ตัวอย่างควรวางไว้ในหลอดที่มีขนาดเท่ากันและเต็มไปด้วยปริมาตรเดียวกัน หากจำเป็นท่อจำลองที่เต็มไปด้วยบัฟเฟอร์ปริมาตรเท่ากันสามารถใช้เพื่อความสมดุลของโหลด

กำลังโหลดท่อ

วางท่อที่สมดุลลงในช่องโรเตอร์อย่างระมัดระวัง ตรวจสอบให้แน่ใจว่าหลอดนั่งและปลอดภัยอย่างเหมาะสม กระชับฝาโรเตอร์เพื่อป้องกันการรั่วไหลใด ๆ ในระหว่างการปั่นแยก

3. การตั้งค่าพารามิเตอร์การปั่นแยก

ขั้นตอนต่อไปคือการตั้งค่าพารามิเตอร์การหมุนเหวี่ยงที่เหมาะสมบนเครื่องหมุนเหวี่ยงตู้เย็น

ความเร็ว

ความเร็วของการหมุนเหวี่ยงจะถูกกำหนดโดยขนาดและความหนาแน่นของอนุภาคไวรัส โดยทั่วไปจะต้องใช้ความเร็วที่สูงขึ้นสำหรับอนุภาคไวรัสขนาดเล็ก สำหรับไวรัสที่พบบ่อยที่สุดจะใช้ความเร็วตั้งแต่ 10,000 ถึง 30,000 รอบต่อนาที (รอบต่อนาที) อย่างไรก็ตามสำหรับไวรัสขนาดเล็กมากหรือสำหรับการหมุนเหวี่ยงความหนาแน่นของความหนาแน่นอาจจำเป็นต้องใช้ความเร็วที่สูงขึ้น

เวลา

ระยะเวลาของการหมุนเหวี่ยงยังขึ้นอยู่กับไวรัสและวิธีการแยก เวลาหมุนเหวี่ยงที่สั้นลงใช้สำหรับขั้นตอนการชี้แจงเบื้องต้นในขณะที่เวลานานขึ้นจะต้องใช้เม็ดอนุภาคไวรัส โดยทั่วไปเวลาในการหมุนเหวี่ยงอาจอยู่ในช่วงไม่กี่นาทีถึงหลายชั่วโมง

อุณหภูมิ

เนื่องจากไวรัสจำนวนมากมีความไวต่ออุณหภูมิจึงใช้เครื่องหมุนเหวี่ยงตู้เย็นเพื่อรักษาอุณหภูมิต่ำในระหว่างการหมุนเหวี่ยง อุณหภูมิมักจะตั้งอยู่ระหว่าง 2 - 8 ° C เพื่อป้องกันการหยุดการทำงานของไวรัส

4. กระบวนการหมุนเหวี่ยง

เมื่อตั้งค่าพารามิเตอร์แล้วให้เริ่มกระบวนการหมุนเหวี่ยง

ตรวจสอบการหมุนเหวี่ยง

ในระหว่างการหมุนเหวี่ยงเป็นสิ่งสำคัญในการตรวจสอบการหมุนเหวี่ยงเพื่อให้แน่ใจว่ามันทำงานได้อย่างราบรื่น ตรวจสอบเสียงหรือการสั่นสะเทือนที่ผิดปกติซึ่งอาจบ่งบอกถึงภาระที่ไม่สมดุลหรือปัญหาเชิงกล เครื่องหมุนเหวี่ยงตู้เย็นที่ทันสมัยส่วนใหญ่ติดตั้งเซ็นเซอร์และสัญญาณเตือนเพื่อตรวจจับปัญหาดังกล่าว

การปั่นแยกเสร็จสิ้น

เมื่อการหมุนเหวี่ยงเสร็จสิ้นการหมุนเหวี่ยงจะหยุดโดยอัตโนมัติ รอให้โรเตอร์หยุดอย่างสมบูรณ์ก่อนที่จะเปิดฝาหมุนเหวี่ยง นี่เป็นสิ่งสำคัญในการป้องกันการรั่วไหลหรือความเสียหายต่อตัวอย่าง

5. โพสต์ - การจัดการหมุนเหวี่ยง

หลังจากการหมุนเหวี่ยงตัวอย่างจะต้องได้รับการจัดการอย่างระมัดระวังเพื่อให้ได้ไวรัสที่แยกได้

การแยกส่วนเหนือและเม็ด

หากวัตถุประสงค์ของการหมุนเหว5000ul micropipette- supernatant มีส่วนประกอบที่ละลายน้ำได้และเศษซากในขณะที่เม็ดที่ด้านล่างของหลอดมีอนุภาคไวรัส

การแขวนลอยของเม็ด

เม็ดไวรัสจะถูกแขวนลอยอีกครั้งในบัฟเฟอร์ปริมาณเล็กน้อย ขั้นตอนนี้ต้องใช้ปิเปตที่อ่อนโยนเพื่อหลีกเลี่ยงการทำลายอนุภาคไวรัส ไวรัสที่ถูกแขวนลอยใหม่สามารถทำให้บริสุทธิ์หรือวิเคราะห์เพิ่มเติม

การควบคุมคุณภาพ

มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะดำเนินการควบคุมคุณภาพของไวรัสที่แยกได้ ซึ่งอาจรวมถึงการวัดไวรัส titer โดยใช้เทคนิคต่าง ๆ เช่นการตรวจคราบจุลินทรีย์หรือปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสเชิงปริมาณ (QPCR) อันเครื่องวิเคราะห์ความชื้นสำหรับอาหารสามารถใช้เพื่อให้แน่ใจว่าปริมาณความชื้นที่เหมาะสมของตัวอย่างในระหว่างการเก็บรักษา

6. การจัดเก็บไวรัสที่แยกได้

การจัดเก็บไวรัสที่แยกได้อย่างเหมาะสมเป็นสิ่งสำคัญในการรักษาความมีชีวิต

แช่แข็งไวรัส

ไวรัสที่แยกได้มักจะถูกแช่แข็งที่อุณหภูมิต่ำมากเช่น - 80 ° C หรือในไนโตรเจนเหลว การแช่แข็งช่วยรักษาไวรัสสำหรับการจัดเก็บระยะยาว อย่างไรก็ตามมันเป็นสิ่งสำคัญที่จะเพิ่ม cryoprotectants ลงในการระงับไวรัสเพื่อป้องกันความเสียหายในระหว่างกระบวนการแช่แข็ง

การติดฉลากและเอกสารประกอบ

ตัวอย่างไวรัสแต่ละตัวอย่างควรติดป้ายอย่างถูกต้องพร้อมข้อมูลเช่นชื่อตัวอย่างวันที่แยกและประเภทไวรัส เอกสารของกระบวนการแยกรวมถึงพารามิเตอร์การหมุนเหวี่ยงและผลการควบคุมคุณภาพก็เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการอ้างอิงในอนาคต

บทสรุป

การใช้เครื่องหมุนเหวี่ยงตู้เย็นในการแยกไวรัสเกี่ยวข้องกับชุดของขั้นตอนที่กำหนดไว้อย่างดีตั้งแต่การเตรียมตัวอย่างไปจนถึงการโพสต์ - การจัดการหมุนเหวี่ยงและการจัดเก็บ ในฐานะซัพพลายเออร์ของเครื่องหมุนเหวี่ยงตู้เย็นเราเข้าใจถึงความสำคัญของการจัดหาเครื่องมือที่มีคุณภาพสูงซึ่งสามารถตอบสนองความต้องการเฉพาะของการแยกไวรัส เครื่องหมุนเหวี่ยงของเราได้รับการออกแบบด้วยคุณสมบัติขั้นสูงเช่นการควบคุมอุณหภูมิที่แม่นยำความสามารถในการใช้ความเร็วสูงและอินเทอร์เฟซที่เป็นมิตรกับผู้ใช้เพื่อให้แน่ใจว่ามีการแยกไวรัสที่แม่นยำและมีประสิทธิภาพ

หากคุณมีส่วนร่วมในการวิจัยการแยกไวรัสหรืองานวินิจฉัยและกำลังมองหาเครื่องหมุนเหวี่ยงตู้เย็นที่เชื่อถือได้เรายินดีที่จะช่วยเหลือคุณ ทีมผู้เชี่ยวชาญของเราสามารถให้ข้อมูลโดยละเอียดเกี่ยวกับผลิตภัณฑ์ของเราและช่วยให้คุณเลือกเครื่องหมุนเหวี่ยงที่เหมาะสมสำหรับความต้องการของคุณ ติดต่อเราวันนี้เพื่อเริ่มการอภิปรายการจัดซื้อจัดจ้างและใช้งานการแยกไวรัสของคุณไปอีกระดับ

การอ้างอิง

• Alberts, B. , Johnson, A. , Lewis, J. , Raff, M. , Roberts, K. , & Walter, P. (2002) ชีววิทยาโมเลกุลของเซลล์ วิทยาศาสตร์การ์แลนด์
• Mahy, BWJ, & Van Regenmortel, MHV (บรรณาธิการ) (2009) สารานุกรมโต๊ะทำงานของไวรัสวิทยาทั่วไป สื่อวิชาการ
• Murphy, FA, Fauquet, CM, Bishop, DHL, Ghabrial, SA, Jarvis, AW, Martelli, GP, ... & Zerbini, FM (2012) Virus Taxonomy: รายงานฉบับที่เก้าของคณะกรรมการระหว่างประเทศว่าด้วยอนุกรมวิธานของไวรัส Elsevier